首先我们介绍几个miRNA的在线数据库以及如何通过筛选到的靶基因或者hub基因搜索与之相关的miRNAs。
数据库miRTarBase v8.0,是一个寻找miRNA非常便捷的网站(图1)。点击download,即可跳转到下载页面(图2),可以下载经过实验验证的或者文献提及存在共表达的miRNA与靶基因互作数据,这里的数据是按照物种统计的。
点击图1的Statistics,还会跳转到数据统计页面,不得不说,这个数据库纳入的还是非常全的,有人、小鼠、大鼠还有其他物种的;使用荧光素酶检测的、芯片检测的、测序检测的还有CLIP-seq检测的,都有(图3)。
点击图1中的Search,即可跳转到检索页面。另外该数据库还是可以基于实验结果进行批量检索(图4)。
另外一个比较友好的在线数据库叫miRWalk 3.0,它是一个很便捷的检索网站(图5)。中间有一个检索框,可以根据实验的相关种属进行接下来的检索。比如检索基因名称XBP1,只需在Gene之后的搜索框输入XBP1即可,就会跳转到相关页面(图6)。同样地,输入miRNA名称也会跳转到相关页面(图7)。
在图5中,下半部分还有一个Target Mining,后两个不用看,造成的假阳性太大,只看前两个。这个可以进行批量上传miRNA和基因名称,从而可以批量获得二者结合数据。值得注意的是,每个miRNA和基因名称必须准确,而且每行一个(图8、图9)。
这些数据都是可以下载,然后Excel打开的。打开之后,就可以去构建miRNAs-hub genes网络图了凯发K8一触即发。如何去构建网络图,可以使用Cytoscape进行图片绘制。凯发K8一触即发
接下来,我们介绍一下如何使用Cytoscape构建miRNA-hub基因网络图。首先得有一个关于miRNA与靶基因相关联的表格文件以及该miRNA与靶基因的属性的表格文件,如下图所示:
之后就可以使用Cytoscape进行miRNA-hub基因网络图绘制了。将上述两个表格分别导入Cytoscape即可。
软件会根据导入的属性表格文件信息判定哪一个是miRNA,哪一个是靶基因,所以只需要在左侧的style中将二者修改为不同的格式,然后导出图片就可以啦。即如下图所示,将颜色和形状根据attribute进行修改,修改完成的图片导出就行,凯发K8一触即发另外导出时候像素一定要选择最大像素,这样可以防止组图时候因图片像素问题还得返工。
好了,miRNA-hub基因网络图的构建就讲完了,是不是很简单,还不赶紧实操起来吧。另外,如果使用了相关在线数据库或者软件,要记得进行相关引用呀。